[의약학] 진단 분자 유전학 REPORT chapter Ⅵ - RT - PCR
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작성일 19-05-24 00:02
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② 동시에 여러 sample 비교 가능.
③ 빠른 전환 시간
◎ RT-PCR 의 단점: PCR 과정 중 기하급수적 증폭이 일어나기 때문에 PCR 효율의 아주 작은 차이도 최종적인 결과에 큰 영향을 미칠 수 있따
◎ RT-PCR 의 4 step ; ① RNA isolation
② Reverse transcription
③ PCR Amplification
…(省略)
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다.
Northern blot, dot/slot blot, nuclease protection assay 는 전통적으로 mRNA 발현 analysis(분석) 에 사용되었던 방법이었으나, 민감도가 떨어지고, 많은 양의 RNA를 요구하기 때문에 비효율적이었다. 왜냐하면 돌연변이는 거의 DNA의 alteration(변화) 에서 오기 때문일것이다
◎ RT-PCR 의 advantage ; ① 다방면에 활용, 민감도가 높다. 돌연변이를 찾고자 할 때는 굳이 RNA를 template롤 할 필요는 없다.
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레포트/의약보건
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진단 분자 유전학 REPORT
chapter Ⅵ ; RT - PCR
▶ RT-PCR ◀
1. Introduction
RNA level을 측정(measurement)할 수 있는 능력은 유전자 발현 연구에 key point(핵심) 적인 역할을 해왔다. 적은 양의 RNA롤 역전사하는 RT의 능력과 PCR의 DNA를 증폭시키는 힘이 짝을 이룬 방법이다.
◎ mRNA와 DNA를 template로 쓰는 것의 차이
mRNA는 같은 genomic DNA에서 origin하였다고 해도 splicing방법에 의해 alteration(변화) 된 것도 찾을 수 있따 또한 각 조직마다의 expression정도를 찾기에도 이용되며, 무 엇 보다 coding sequence만 연결된 구조를 원할 때 쓰인다. 그에 비해 적은 transcript와 한정된 양의 물질로도 작업이 가능한 RT-PCR은 혁신적인 변환이었다.
